molbiol.ru -> Выделение DNA из мух c DEPC

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* Выделение DNA из мух c DEPC -- comments to a permanent page of the site --

Тема связана с: Выделение из мух (c DEPC)
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

Forum robot
Постоянный участник
на сервере в Москве

02.06.2005 11:58

URL #1

Быстрый и удобный метод выделения геномной ДНК дрозофилы. DNA вполне годится для Southern анализа или PCR. Содержание DNA в мухах: самец ~ 0.75 микрограмм, самка ~ 1 микрограмм.

мух
IP-штамп: frW0uqO/N5.7k
гость

02.06.2005 13:28

URL #2

очень хочется чтобы протокол был более полным

мух
IP-штамп: frW0uqO/N5.7k
гость

02.06.2005 13:28

URL #3

очень хочется чтобы протокол был более полным

Гость
IP-штамп: frQJx3mR5SbdU
гость

14.07.2008 09:45

URL #4

Протокол, который я использую при сходном составе буферов.
1. Поместить одну-несколько мух (можно - любые другие организмы, которые можно легко растереть пестиком в пробирке; спиртованный материал - предварительно подсушить) и залить 200 мкл "рабочего раствора".
2. Гомогенизировать содержимое пробирки.
3. Инкубировать при 65 град. 30 мин.
4. Добавить 300 мкл 5М/3М Ацетата калия (3М ацетата калия + 2М - уксусной кислоты). Перемешать.
5. Инкубировавть на льду 30 мин.
6. Перемешать; центрифугировать 10 мин при 13 тыс об/мин.
7. Перенести супернетант в новую пробирку.
8. Добавить равный объём 96% этанола (500 мкл).
9. Перемешать. Оставить на столе на 5-10 мин.
10. Центрифугировать 10 мин 13 тыс об/мин.
11. Удалить супернатант. Добавить 96% этанол (400 мкл).
12. Перемешать, так, чтобы осадок не при этом не оказался прилипшим к части пробирки не смачиваемой спиртом. Оставить на столе на 3-5 мин
13. Центрифугировать 3-5 мин при 13 тыс об/мин.
14. Тщательно отобрать спирт.
15. Подсушить осадок в пробирках, оставив их открытыми в микротермостате при 37 град не менее 20 мин.
16. Растворить в 50 мкл воды.

При таком выделении ДНК может существенно (для ПЦР) деградировать при хранении более 6 мес при 4 град.

watchesbiz
Постоянный участник

04.01.2022 18:45

URL #5

https://wanelo.co/replicarolexwatches
https://musescore.com/fakerolexwatches
https://www.racked.com/users/Replicarolexwatches
https://sketchfab.com/Rolexrelicawatches
http://www.video-bookmark.com/bookmark/433...eplica-watches/
https://www.slideserve.com/ReplicawatchesUK...pt-presentation
https://www.theverge.com/users/Replicarolexwatches
https://www.yumpu.com/en/document/read/6532...lica-watches-uk
https://online.flippingbook.com/view/152275247/
https://www.instapaper.com/p/8767342
https://www.bigblueview.com/users/Replicarolexwatches
https://weheartit.com/watcheshutuk
https://sites.google.com/view/replicarolexwatches24/home
https://www.indiehackers.com/post/hints-on-...atch-113aef73a9
http://replicawatchesuk.esportsify.com/for...ica-rolex-watch

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.