Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Forum robot Постоянный участник на сервере в Москве |
Приготовление предметных и покровных стекол для микроскопии. Обработка предметных стекол TESPA. Обработка предметных стекол poly-L-lysine. Обработка и хранение покровных стекол. |
Гость IP-штамп: frftLGqhpFF.A гость |
Solutions: The silane material comes in a liquid form from Sigma. The full name is 3,aminopropyltriethoxysilane. Procedure: 1. Dip slides in 2% silane/acetone solution for one minute. 2. Dip slides in 100% acetone for one minute. 3. Dip slides in double distilled water for one minute. 4. Repeat step 3 with agitation. 5. Air dry. 6. Apply sections on a drop of water on the slide. 7. Dry on 60°C hot plate for 2 - 5 minutes. 8. Air dry at room temperature overnight. These silanized slides can be stored at room temperature for months without any problems. |
_Сашок_ IP-штамп: frftLGqhpFF.A гость |
Иногда обстоятельства оборачиваютя так, что возникает необходимость обработки срезов ферментами. При обработке трипсином срезы, нанесенные на стекло с pLys все равно отваливаются. Трипсин специфично расщепляет Lys - Lys связи. Поэтому мы нашли альтернативный метод, которым сейчас активно пользуемся. Первоначально он был разработан для увеличения силы адгезии клеток к стеклу, и их распластыванию, но для имунногистохимии срезов in situ тоже походит. Подготовка предметных стекол: 1. Промывают стекла в 1М HCl в течение 20 мин., затем в проточной воде 30 мин. 2. Сполоснуть dH2O и высушить. 3. Погружают стекла в 2% органосилан (гамма-аминопропилтриэтоксисилан) в ацетоне*. 4. Инкубация 30 мин. при комнатной температуре. 5. Промывают в проточной воде в течение 30 мин., затем в 3 сменах стерильной. 6. Высушивают стекла в термостате при 100 C в течение 1 часа. 7. Хранят при комнатной температуре в защищенном от пыли месте. * - р-р органосилана хранят в течение суток. Органосилан продается под названием АГМ-9. |
Гость IP-штамп: frFrHZMiJqwK2 гость |
|
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |