Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
ИФНС IP-штамп: frlnAsDr.5x7A гость |
|
Ольга_i-v-a IP-штамп: frRAbmeRhS4Qw гость |
|
Yuri K IP-штамп: frbSxBL61s/9I гость |
(Ольга_i-v-a @ 08.04.2009 21:09) Помогите пож-та... нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо! Tough call ;-) pH 7.5 roughly equals the 2nd pKa of the phosphoric acid (7.2). So at pH 7.5 you will have approx. equal concentrations of HPO4(2-) and H2PO4(-). Let us call this concentration X. You will also have potassium concentration that equals 2X+X=3X total. Thus, your ionic strenght equals 3X+X+X^2. Solving the equation X^2+4X=0.05 we find that X=~0.125. So to make 1 L of buffer you have to take 0.125 mole of KH2PO4 and 0.125 mole of of K2HPO4 and adjust the pH to 7.5 with acid or alkali. |
Guest IP-штамп: frKEKi7a2OV4A гость |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Сообщение было отредактировано -Ъ- - 07.10.2010 10:40 |
Guest IP-штамп: frKEKi7a2OV4A гость |
То есть присутствие ионов натрия категорически запрещается? Это каким-то негативным образом сказывается на форезе? Просто я буфер готовила с добавлением двунатриевой соли ЭДТА и ничего вроде, а тут на форуме в прописях увидела, что ЭДТА надо добавлять не из стока и задумалась правильно ли я его готовлю... |
Yuri K IP-штамп: frLI8F3pAObfM гость |
(-Ъ- @ 07.10.2010 10:37) Впервые слышу, коллега. Там натрия настолько мало, что едва ли он на чем-то скажется. Народ обычно берет готовый ЭДТА раствор из сигмовской банки 0.5 М динатриевая соль, и не берет в голову. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Криминала, конечно, никакого если используется р-р ЭДТА 0,5 М с рН 8.0.,, но лучше исключить (минимизировать) ионы сильных кислот и оснований из ЭФ буфера. К тому же оказалось очень удобно смешивать сухие компоненты буферов (особенно в случае ТБЕ) и при этом я заменил динатриевую соль на свободную кислоту и тем самым снизил рН и ионную силу (проводимость) буфера. |
Guest IP-штамп: frKEKi7a2OV4A гость |
|
Solar7 |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Solar7 @ 27.10.2010 17:51) Доброго дня участникам и корифеям! У меня вопрос как раз в тему - нужен органический буфер с низкой проводимостью. Сейчас проверяю натрия салицитат, но хотелось бы избавиться от ионов натрия... чем бы Вы предложили "запаровать" салициловую кислоту, чтобы сделать буфер рН 8.5-9.0, не слишком дорогое и дефицитное? Как вариант, трис? Спасибо! Если Трис не противопоказан, готовите Трис ОН 2М (!!!), это близкий к насыщенному раствор, также готовите максимально концентрированный раствор салициловой кислоты (для удобства тоже 2 М). Смешивая разные объемы эквимолярных растворов готовите 1М раствор Трис-салициловой кислоты нужного рН. Я так готовлю 1М Трис-глициновый, то бишь Трицин, буфер с рН 8,5. |
Daemonarchestratygos Постоянный участник |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Daemonarchestratygos @ 27.10.2010 22:49) Манияк... |
k204781 |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(k204781 @ 19.11.2010 01:08) Подскажите, пожалуйста, как правильно приготовить 0,1 М натрий-фосфатный буфер (рН=8,0, V=500 мл). Столько прописей нашлось, что в голове полная каша! Буфер необходим для биотинилирования белка. И еще вопрос, натрий-фосфатный буфер и PBS одно и тоже? 1. А давайте ваши прописи, лучше одну, обсудим... 2. PBS - это физраствор в фосфатном буфере. Протокол приготовления: Р-рить 8 г NaCI, 0,2 г КС1, 1,44 г Na2PO4 и 0,24 г KH2PO4 в 800-900 мл воды, довести рН до 7,4 НС1. Довести до 1л водой. Надо ли пересчитывать для 0,5 л? |
aszx1237 |
Заранее благодарен. |
aszx1237 |
|
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
Справочник биохимика доусона почитайте главу про буферные растворы там вначале теория дается, а потом практика. Для начала вам хватит. А так возьмите хороший учебник по аналитической химии там много про буферные системы написано. |
mora733 |
Можно ли заменить фосфатный буфер Соренсена(0,1 М) с рН 7,2 обычным PBS c таким же рН.Нужен для С-бэндинга хромосом. |
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
По идее можно
|
Вячеслав Б |
В прописи ТБЕ буфера действительно ошибка, не может там быть 43,84 г! И, написано, ЭДТА рН 8, а коллега-Ъ- говорит, что натрий ни к чему. Кто прав? А то я как идиот делал из ЭДТА фри асид соль, добавляя NaOH. |
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
2)можете делать из кислоты, но тогда триса больше сыпать придется или боркиса меньше. Но на самом деле 2-5мМ натрия это такие малозначительные крохи, что можно и не забивать себе голову. А 0.5М ЭДТА рН-8 вещь вообще полезная в хозяйстве. |
inessaviv |
Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?Благодарю заранее.Биохимик начинающий,поэтому туговато inessaviv@gmail.com |
R.J. Dio Постоянный участник |
2) молярность по Трису, в чем проблема? Биохимик -то начинающий, а студент-то конченый? Вас не учили? Аналитики не было? Тогда зачем Вам трис, разводите марганцовку в воде, красиво и познавательно Сообщение было отредактировано R.J. Dio - 25.06.2013 21:28 |
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
Только ч. покупать не рекомендую(хотя для экстрагирующих буферов и он подойдет) Покупайте осч или имп. последний уточните откуда и какой марки. --Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать? Пересчитывать надо на молярность триса-основания(мол вес 121) |
ASabina |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(ASabina @ 17.09.2013 10:39) подскажите пожалуйста! надо приготовиться ПБС рН=7,2, но при этом к нему необходимо добавить 2,25% глицина. возможно ли это сделать и как (на каком этапе). при добавлении глицина рН очень резко падает до 5,9 и повысить ее никак не почается (5Н НаОХ) НСI исключите из протокола. А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)? Сообщение было отредактировано -Ъ- - 17.09.2013 10:27 |
R.J. Dio Постоянный участник |
|
LMP Постоянный участник |
(-Ъ- @ 17.09.2013 08:15) подозреваю, что это пяти- нормальная щелочь)) |
kirush |
как для этого растворить буру? |
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
|
kirush |
|
R.J.Dio Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |