Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Forum robot Постоянный участник на сервере в Москве |
|
Гость IP-штамп: frswkCVHxyt0w гость |
|
Mac-1 Постоянный участник оттуда |
(Гость @ 16.06.2005 05:39) Прошу написать знающих людей, как можно разогнать на электрофорезе изоформы цитохрома Р 450 (2% агароза, горизонтальный электрофорез). Попробуйте ИЭФ - изоэлектрофокусирование в амфолитах (фармалитах, если их еще выпускают). Я когда-то видел фотографию разделения изоформ цитохрома именно таким способом. К тому же, если не ошибаюсь, эти изоформы входили даже в кит маркеров для ИЭФ. |
_Danil_ IP-штамп: frftLGqhpFF.A гость |
Нагревание геля в процессе полимеризации чаще всего его (процесс) безусловно ускоряет но может привести к тому что гель получится корявый |
Oligolamer IP-штамп: frswkCVHxyt0w гость |
почему бы не развести форез на качественный и количественный (главы в одной теме?), чтоб не было путаницы и "ляпов" из-за применения одного для кардинально другого? |
Guest IP-штамп: frVUncTC1Qf86 гость |
|
guest: Oligolamer IP-штамп: frswkCVHxyt0w гость |
Не понял Вашего (логики) ответа. |
Redactor admin. Берлин, Германия |
(Oligolamer @ 10.04.2006 13:52) Автору (Администрации): почему бы не развести форез на качественный и количественный (главы в одной теме?), чтоб не было путаницы и "ляпов" из-за применения одного для кардинально другого? Я сам просто не смогу разделить на две методики. У меня опыта не хватает нормально описать отличия одного от другого. |
Oligolamer Украина |
Но если можно (кто-нибудь добрый), объясните/уточните такие позиции в методике: * Подготовка форезного аппарата (кстати, "если после номера пункта стоит точка - то предложение пункта пишется с заглавной буквы) ...3. Если хочется, чтобы гель легко снимался со стекол — силиконизировать. У нас в лаборатории говорят, что силиконизирование даёт обратный эффект - гель лучше прилипает. З.Ы. При этом в комментариях для п.3. идёт ссылка на: п.3. Силиконизирование - см. "Сиквенс" Где bind-silane очень летучее вещество и даже небольшого его количества достаточно, чтобы приклеить гель к стеклу * Количество олигонуклеотидов на дорожку нижний предел (с красочками) - явно рассчитан на качественное определение... верхний предел (без красок) - для кол-венного определения Только что значит - разрешение ещё приемлемое? Если больше - то,что будет - дорожки "перекрываются" или олиги не "бегут"? * Выбор % геля 7. на 12х8х0.07см3 гель требуется ~7ml (лучше приготовить 10ml). Что за величины?! Выше же было "если брать ~10µg на 10х0.5 mm2 ячейку", т.е. толщина 0,5 мм; а тут вдруг 0,07 см какие-то (откуда ещё 0.2 мм "нарисовались")? * расплавленную 2% агарозу (в ТВЕ 1x) налить ... КАКУЮ АГАРОЗУ?! - ведь в ПААГе олиги гоняют?! Или эта статья выложена на всеобщее обозрение чтобы задурить головы возможным конкурентам?! - ну, нельзя же так, право слово Сообщение было отредактировано Oligolamer - 13.04.2006 16:10 |
Тот Самый |
Силан для силиконизирования двух сортов бывает: связывающий и отталкивающий. Ну и т.д. и т.п. |
A Chemist Постоянный участник Минск |
Силан для силиконизирования двух сортов бывает: связывающий и отталкивающий. Это не совсем точное утверждение. Есть еще как минимум один сорт, третий (не брак). |
Re Участник |
(Oligolamer @ 13.04.2006 11:06) Хорошо, может методики разводить и не надо (а просто я - ...lamer ). Но если можно (кто-нибудь добрый), объясните/уточните такие позиции в методике: У нас в лаборатории говорят, что силиконизирование даёт обратный эффект - гель лучше прилипает. КАКУЮ АГАРОЗУ?! - ведь в ПААГе олиги гоняют?! Или эта статья выложена на всеобщее обозрение чтобы задурить головы возможным конкурентам?! - ну, нельзя же так, право слово Спокойно. дружище, спокойно... Стекла мойте, силиконизировать "repel" - силаном вряд ли понадобится. Агарозу, если посмотрите на картинку, используют как пробку, чтобы акриламид до полимеризации не вытекал. Если толщина геля не как для сиквенса, он может вытекать даже при заливке в горизонтальном положении. тут уж кто резиночку прокладывает, кто агарозную пробку делает, кто спейсеры смазывает, - словом, лучше самодельную методику перенимать из рук в руки, или фирменную - по инструкции к прибору. |
Oligolamer Украина |
"инструкции к прибору" Это как - прибор для олигофореза? - звучит забавно (: К сожалению, хотелось бы чтоб эта онлайновая методика была концептуальна. А то пока что выгдляит так, как будто натянули материалу из разных методичек... |
Guest IP-штамп: frYCDKWxyC83I гость |
по методике на сайте, олиги можно увидеть по теням на бумаге или хроматографической пластинке. Не знаю что я делаю не так, но никаких теней не видно. Источник УФ - обычный трансиллюминатор. |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |