Клеточники, скажите, когда надо использовать PBS без Ca и Mg, а когда с этими ионами. Вопрос касается отличия между просто отмывкой клеточной культуры от старой сыворотки и деадгезией (до полной флотации) для последующего пересева этих клеток. Насколько логика мне говорит, здесь всё зависит ещё и от видов рецепторов адгезии, и от уровня эспрессии этих рецепторов. До сего дня всегда мыл клетки просто PBS, а потом мне сказали, что надо мыть их PBS с Ca и Mg, иначе уплывут клетки. И это независимо от того, что ты ещё и Трипсин-Версен используешь. Это для меня что-то новое и мне необходимо понять, в чём фишка.

если просто отмыть от сыворотки - мойся растворами с Ca/Mg
если снимать клетки - моися растворами без Ca/Mg
если трипсин, то его надо сготовить на растворе с Ca/Mg


[Текст переведён с транслита]

Cells-nnm дык если трипсин-версен т.е. трипсин эдта то зачем с кальцием и магнием?????
Практически никогда при простом пересеве не мыл клектки ( правда не знаю с какими вопросант работает).....

[Текст переведён с транслита]

2 Tom1
есть мнение,что трипсин приготовленный на растворе, содержащем Ca/Mg лучше работает...
может трипсин (на безCa/Mg растворе)- Версен (ЭДТА) и также хорошо работает как и один трипсин (на Ca/Mg растворе), даже холодный Т-В сработает...
я честно сравнительных исследований не проводил
2 Centriole
не знаю что там происходит с рецепторами адгезии на молекулярном уровне....
в любом случае безCa/Mg растворы нужны только для деаттача
как и хелаторы (ЭДТА)

снимать клетки трипсином - без катионов, по крайней мере я всегда так делаю. Причина: они стабилизируют САМ щелевые контакты, и кажется всё остальное, поэтому клетки не отвалятся пока протеаза их не съест, а это долго. Без ионов: клетки еще с белками на поверхности, но уже разъединены => ? потом быстрее образуют новые контакты
а работает трипсин и без Са прекрасно.

отмыть от сыворотки мне кажется лучше средой, а если буфером то с ионами

если трипсин - Версен (ЭДТА) то уж точно без доп ионов.

еще один фактор: гликокаликс, его понятно лучше не разрушать, и в этом плане любые хелаторы в р-ре - плюс.. но это так, гениальный экспромт :-)

снимать клетки трипсином - без катионов, по крайней мере я всегда так делаю. Причина: они стабилизируют САМ щелевые контакты, и кажется всё остальное, поэтому клетки не отвалятся пока протеаза их не съест, а это долго. Без ионов: клетки еще с белками на поверхности, но уже разъединены => ? потом быстрее образуют новые контакты
а работает трипсин и без Са прекрасно.

отмыть от сыворотки мне кажется лучше средой, а если буфером то с ионами

если трипсин - Версен (ЭДТА) то уж точно без доп ионов.

еще один фактор: гликокаликс, его понятно лучше не разрушать, и в этом плане любые хелаторы в р-ре - плюс.. но это так, гениальный экспромт :-)

снимать клетки трипсином - без катионов, по крайней мере я всегда так делаю. Причина: они стабилизируют САМ щелевые контакты, и кажется всё остальное, поэтому клетки не отвалятся пока протеаза их не съест, а это долго. Без ионов: клетки еще с белками на поверхности, но уже разъединены => ? потом быстрее образуют новые контакты
а работает трипсин и без Са прекрасно.

отмыть от сыворотки мне кажется лучше средой, а если буфером то с ионами

если трипсин - Версен (ЭДТА) то уж точно без доп ионов.

еще один фактор: гликокаликс, его понятно лучше не разрушать, и в этом плане любые хелаторы в р-ре - плюс.. но это так, гениальный экспромт :-)

Если вам для опыта нужно сохранить адгезию межклеточную и с субстратом, то необходимо добавлять кальций и магний. А если вы снимаете клетки для пересева, то их добавлять не надо - у вас тогда хуже клетки разобьються, островками сядут, если вообще сойдут, хотя надо конечно знать, что за клетки. Т.е. Ca сохраняет адгезию.

Thank a lot. You have done excellent job. I enjoyed your blog . Nice efforts Rehabilitation

Really nice and interesting post. I was looking for this kind of information and enjoyed reading this one. Keep posting. Thanks for sharing. Rehabilitation

I just got to this amazing site not long ago. I was actually captured with the piece of resources you have got here. Big thumbs up for making such wonderful blog page! Urology

I curious more interest in some of them hope you will give more information on this topics in your next articles. Rehabilitation

I must admit that your post is really interesting. I have spent a lot of my spare time reading your content. Thank you a lot! Rehabilitation

The web site is lovingly serviced and saved as much as date. So it should be, thanks for sharing this with us. Rehabilitation

Interesting post. I Have Been wondering about this issue, so thanks for posting. Pretty cool post.It 's really very nice and Useful post.Thanks Urology

I have read your article; it is very informative and helpful for me. I admire the valuable information you offer in your articles. Thanks for posting it. Urology

Great tips and very easy to understand. This will definitely be very useful for me when I get a chance to start my blog.Urology

Nice knowledge gaining article. This post is really the best on this valuable topic. Urology

Medical Phd

As with all writing บาคาร่าออนไลน์ the language should be slot xo suitable for the audience. 11hilo the language will need to be สล็อต While each has specific 123GOAL easy for that age group to understand

but also exciting and lively nigoal enough to make them ลิงค์รับทรัพย์ common characteristics. พ ริ ต ตี้ เกม มิ่ง want to read it. ราคา บอล Each section has a heading Hotgraph that outlines the main topic