Для выполнения дипломной работы (тестирование прототипа установки для криоафереза) нужны методики опреления концентрации криобелков. Подскажите как их достать, определяет кто-нибудь криоглобулины в Москве (желательно знать количественный анализ, но если есть качественный или полуколичественный - тоже хорошо). Подскажите литературу на эту тему, лучше русскоязычную или адрес в Internet.

А под криобелками вы что подразумеваете?

Просто насколько я понимаю, это комплексы нерастворимые в плазме при температуре ниже 5с и состоящие из поли-Ig и участков различных других молекул(глико-липо-нуклео и т.п.) при патологии, мусор такой своеобразный.Если они при выделении преципитируют, то как вы определите концентрацию твердых веществ? Из методов которыми их видно, я знаю только иммунопреципитацию. Их молекулярная масса (посчитайте)не позволяет делать форез.
Занимается(лась) этим кафедра физики МБФ РГМУ, зав Константинова Нелли Александровна, у нее есть две книги по криобелкам.
можно определить ТР (например по Бредфорду) , затем осадить криобелки и снова определить ТР, разница - Ваша

Можно ещё в гематологический центр обратиться - там как раз некоторые клинические анализы по этому поводу делали лет пять назад. Делают ли сейчас - не знаю, но думаю, что да.

Дорогой MrDmitry! Рад за вашу осведомленность в области преципитации белков. Только вот, как Вы объясните тот факт, что существуют моноклональные антитела против различных классов криоглобулинов? Да и в солидных учебниках про них стали писать. К тому же некоторые патологии с ними связаны, например, синдром Шагрена.
Как их выделяет г-жа Константинова никакой критики не выдерживает, потому что с ними вываливается куча другого мусора, например ЦИК.
Если Вы будете так любезны, то сообщите г-же Дарьяне об иммунологических спсобах определения концентрации криоглобулинов (во всяком случае, я думаю, что здесь надо ELISA использовать).

Уважаемый MrDmitry, как это так - "их мол. масса не позволяет делать форез"? А трициновый?

1. то МАТVEY: Что значит существуют моноклональные антитела? Вообще любое антитело моноклональное.Поликлональные антитела это природный пул различных моноклональных антител.Ястно, что антитела есть на ВСЕ, есть (всегда) аутоантитела и каждое в отдельности моноклональное.Если вы имеете в виду, что они существуют в продаже,то конечно, криоглобулин-гибридома-моноклональные антитела на что угодно.Только чтобы сделать ИФА нужно их купить ссекундочку

а потом собрать на их основе ИФА.Это очень долго.Нужно посмотреть что есть из готового в продаже,или пытаться использовать имм.преципитацию,турбидиметрию(изм оптической плотности при образовании комплексов АГ-АТ в растворе),или придумать какой-нибудь вариант фореза(см предыдущее сообщение)Тут надо исходить из материи, а я как, уже сказал, не знаю что сейчас подразумевают по термином криоглобулины.Надо посмотреть.

Преципитировавший белок нельзя померять? Ну почему же? Открутил, растворил осадок в мочевине и сунул в фотометр. Откалиброваться разик по азоту и вперед, с песнЯми. Не супер-пупер точность, но вполне количественно. Или материала очень мало?

To MrDmitry
Если это как я понял своеобразный мусор то не спасет а только внесет непонятки.
Если есть антитела полицлональные можно просто рокетный иммунофорез поставить
[Текст переведён с транслита]
[Текст переведён с транслита]

Министерство здравоохранения и социального развития РФ
Российская академия медицинских наук
Ассоциация ревматологов России
ГУ Институт ревматологии РАМН
Адрес Оргкомитета:
115522 Москва, Каширское ш., 34а
Тел/факс 8 (499) 614-44-76 e-mail: omsi@irramn.ru

А разве одним из главных компонентов не является фибронектин человеческой плазмы (Cold insoluble globulin) ? - или какая-то терминологическая путаница...

Есть три класса криоглобулинов (насколько помню):

1. Моноклональные IgG или IgM
2. Моноклональные IgG и IgM
3. Поликлональные IgG и IgM

Насчет фибронектина не слышал. Определять их довольно просто.

http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...74&blobtype=pdf

Есть модификации. В и-нете полно. Google поможет.

-судя по нижеприведенному, фибронектин является компонентом криоглобулинов: "К группе гамма-глобулинов относится также криоглобулины. Это белки, которые способны выпадать в осадок при охлаждении сыворотки. У здоровых людей их в сыворотке нет. Они появляются у больных с ревматическим артритом, миеломной болезнью.
Среди криоглобулинов существует белок фибронектин. Это высокомолекулярный гликопротеин (молекулярная масса 220 кДа). Он присутствует в плазме крови и на поверхности многих клеток (макрофагов, эндотелиальных клеток, тромбоцитов, фибробластов)."
http://www.medkurs.ru/lecture2k/biochemistry/lb15/4228.html. Да и в ранней литературе он часто именовался как "Cold insoluble globulin"- если это то же , что криоглобулин.
Кстати, по литературе нет определенности, есть он в нормальной сыворотке человека или нет. То утверждается, что нет, то попадаются данные, что на уровне 100-150 нг/мл сыворотки таки есть - а в плазме, разумеется, его концентрация выше.

Есть статья в журнале "Гепатологический форум" №3 2005 (Издается 4 раза в год с 2005 года, является приложением к журналу "Клин фармакология и терапия"). Статья: "Криоглобулинэмия" Л.В. Козловская, С.Ю. Милованова, С.В. Тэгай.

В ней очень понятно и доступно освещено что такое криоглобулины и криоглобулинэмия. Найти в инете не пыталась, поэтому пишу выдержки:
"КГЭ - состояние, характеризующееся наличием в сыворотке крови одного или более иммуноглобулинов, обратимо преципитирующих при температуре 37С".

"Классификация КГЭ по компонентам криопреципитата:
I типа - криоглобулины состоят из моноклональных иммуноглобулинов (парапротеины) только одного класса - наиболее часто IgM или IgG;
II типа - кг образуются из иммуноглобулинов разных классов - поликлональный IgG и моноклонального IgM
III тип - кг образуются из поликлональных IgG и поликлональных IgM.
Причем поликлональный IgG во II и III типе является антигеном, а IgM - антителом, направленным к Fc-фрагменту IgG, т.е. представляет собой ревматоидный фактор (РФ)"

"Криоглобулинэмия обнаруживается при: множественной миеломе, хр лимфолейкозе, вирусных инфекциях (! особенно гепатит С), а также аутоиммунных заболеваниях. "

Исходя из всего вышенаписанного:
Криоглобулины - иммунные комплексы состоящие из IgG и\или IgM, которые при температуре ниже 37С выпадают в осадок, образуя основную часть криопреципитата.
В состав криопреципитата могут также входить: вирусная ДНК, РНК и микробные агенты; комплемент; фибронектин; бета-липопротеин; альф2-макроглобулин; фибриноген.


Методика оперделения криоглобулинов (она скорее для клиники, но может пригодиться):
"КГ измеряют в сыворотке полученной после центрифугирования крови при 37С в течение 10 минут на 2500 оборотах. Сепарированную сыворотку в количестве 10 мл переносят в градуированную пробирку и инкубируют при 4С в течение 7 дней, но допускают и возможность 4-дневной инкубации. При образовании преципитата или геля пробирку центрифугируют при 2500 оборотах в течение 30 мин при 4С. Величину криокрита измеряют по отношению к общему объему образца сыворотки подобно гематокриту и выражают в процентах. Супернатант удаляют, криопреципиатат промывают дважды в фосфатном буфере, фентрифугируя в течение 5 мин при температуре 4С, затем отмытый преципитат ресуспензируют, определяют концентрацию белка в 1 мл сыворотки и с помощью различных методик (иммуноэлектрофорез, иммунофиксация, иммуноблотинг) изучают изотип и клональность иммуноглобулинов".

Кстати, по литературе нет определенности, есть он в нормальной сыворотке человека или нет. То утверждается, что нет, то попадаются данные, что на уровне 100-150 нг/мл сыворотки таки есть - а в плазме, разумеется, его концентрация выше.
[/quote]
Если речь о фибронектине, то он-таки в крови есть и много. Его оттуда и получают, очень простым способом. Насколько я знаю, других способов получения и нет.

- то, ч то и в крови фибронектина хватает, и в плазме тоже, хорошо известно. Вопрос в другом - является ли он компонентом криоглобулинов, высаживаемых из сыворотки нормальных доноров, а не пациентов ревматологов .

Medical Phd

As with all writing บาคาร่าออนไลน์ the language should be slot xo suitable for the audience. 11hilo the language will need to be สล็อต While each has specific 123GOAL easy for that age group to understand

but also exciting and lively nigoal enough to make them ลิงค์รับทรัพย์ common characteristics. พ ริ ต ตี้ เกม มิ่ง want to read it. ราคา บอล Each section has a heading Hotgraph that outlines the main topic