Подисскутировать на эту тему меня сподвигнула последняя публикация в Bone Marrow Transplantation на эту тему.



V Antonenas, PJ Shaw, KF Bradstock. Infusion of unwashed umbilical cord blood stem cells after thawing for allogeneic transplantation.

Bone Marrow Transplantation advance online publication, 30 August 2004;

doi10.1038/sj.bmt.1704650

http//www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/utils/lofref.fcgi?PrId=3094&uid=15334050&db=pubmed&url=http//dx.doi.org/10.1038/sj.bmt.1704650



Предпосылки

2 группы - Hahn T, et al.

http//www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=12838278

и Nagamura-Inoue et al

http//www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=12919432

, недавно (2003) сообщили о том, что неродственная трансплантация

кордовой крови с отмывкой от криопротектора после разморозки или без таковой не имеет никакой разницы по engraftment(у) и безопасна для пациентов.

А выгода определяется фактом потери части клеток при отмывке, что грозит недостаточной дозой гемопоэтических клеток на кг. веса пациента. Поскольку количество трансплантаций клеток кордовой крови прогрессивно увеличевается во всём мире, вопрос об оптимальной схеме подготовки клеточной суспензии перед трансплантацией остаётся открытым и дисскутабельным.

Первичные рекомендации по этому поводу были изложены в PNAS в 1995 году

http//www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=7479737

и подразумевали обязательную отмывку от ДМСО. Этого правила

придерживается большая часть центров.

Авторы сообщения подтверждают факт потери большого количества (27.2%) ядерных клеток трансплантата в процессе отмывки от криопротектора.

Однако имеется сообщение, указывающее, что число CD34+ клеток до заморозки и после (с отмывкой) остаётся неизменным. (Blood 2003; 102 462a (abstract 1685).



Вот, кстати, последнее утверждение мне кажется наиболее дисскутабельным (наверно сделаю отдельный форум).



----

тему можно экстраполировать на общие актуальные вопросы клеточной трансплантации вообще.



Знаю людей, которые вводили клетки в/в без отмывки от криопротектора (я только



про ДМСО). Растворяли в 400 мл. физ р-ра и вперёд. Казалось бы в такой дилюции ДМСО уже не способен дать каких-либо реакций.

Однако имеются публикации по высокой токсичности ДМСО,

вызывающего различные расстройства.

http//celltranspl.ru/journal/news/?MESSAGES[1]=SHOW_NEWS&NEWS_ID=533

http//www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?сmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=10871736



у кого какие соображения на этот счёт?

Особо приветствуюся мнения специалистов из центров трансплантации костного мозга.

Отмывать от ДМСО или нет для клиники?

- очень важный вопрос, который может серьезно повлиять на результат трансплантации.

Но разные отделения трансплантации решают его по разному.



Любые манипуляции с клетками и каждая минута после "разморозки" материала - ведут к уменьшению количества живых клеток. Поэтому если концентрация ДМСО низкая (что позволяют достичь методика) - живые клетки важнее, чем токсичность ДМСО. Это мнение Демура Мхеидзе из Онкоцентра и тамошних трансплантологов.

почти все описания осложнений от ДМСО ссумировал здесь -

http://celltranspl.ru/journal/news/?MESSAGES[1]=SHOW_NEWS&NEWS_ID=882



а снижение концентрации ДМСО до 5% - старая песня, уже много опубликовано по этому вопросу, с трегалозой и без, возможно скоро внесут поправки в стандарты банков



да и токсичность ещё завит от того 1. в чём развели жижу после разморозки

2. в каком объёме развели (пол-литры, литра...)

3. сопутствующих проблем оранизма донора (заболевания лёгких, сердечная недостаточность, аллергии...)

[quote]Однако имеется сообщение, указывающее, что число CD34+ клеток до заморозки и после (с отмывкой) остаётся неизменным. (Blood 2003; 102: 462a (abstract 1685).



Вот, кстати, последнее утверждение мне кажется наиболее дисскутабельным (наверно сделаю отдельный форум). [/quote]



Да, да... что-то не очень логично насчет неизменного количества CD34+ после таких манипуляций - надо попробовать - сравнить. Хотя может количество и останется неизменным :smt044

только качество поменяется - клеток в апоптозе, например, будет больше.

Всем привет .....

Точно знаю, что в нашем центре ТКМ, от ДМСО не отмывают (работают с аферезной стимулированной), просто быстро размораживают, разводят в 400 мл физ. р-ра, и вперед !!!

Правда при концентрации 10% ДМСО были сложности - середечко колотило, рвота (сложно купировалась) да и вообще не самый лучший вариант получался.... Потом скинулидо 7% ДМСО и все вроде бы успокоилось, по крайней мере таких ярких реакций небыло !

По поводу энграфтинга - учитывая что почти все ТКМки были аутологичными, все были удачными и по времени не отличались !

Так что наверное имеет смысл купировать нежелательные эффекты от ДМСО, зато клеток точно хватит для приживления, чем избавиться от нежелательных эффектов ДМСО и получить graft failure !!!

МЫ за менее страшные варианты !

Такое малое количество ДМСО не может оказать практически никакого отрицательного влияния. Есть же препарат Димексид (тот же ДМСО) который вводят как противовоспалительное средство (наружно, ректально, внрутрипузырными инстилляциями). Поэтому Вам больше надо беспокоиться о скорости введения клеток после размораживания чтобы как можно больше живых клеток было, хотя в процессе замораживания оттаивыания все равно будет много погибших клеток. Но даже если их будет 60% это также супер, остальное количество просто выведется из организма и все дела. Поэтому как только клетки в криовиале разморозились сразу используйте их для введения. Вполне возможно в каком нибудь благоприятном растворе типа Полиглюкина или Реополиглюкина, важно чтобы рН раствора была нейтральная 7,0-7,2 и температура раствора комнатной температуры.
Можно также клетки ввести в 5% раствор глюкозы для инфузий, на худой конец просто на физрастворе.
Не обязательно в качестве криопротектора использовать также DMSO вполне приемлемо использование по старинке 10% глицерина от сосатва криосреды, но глицерин уже потом надо будет отмывать.

to виталий -

какая концентрация? 10%? это пока стандарт для BMT-клиники
если вы внимательно читали топик и копались в архивах журналов типа Bone Marrow Transplantation за последние 20 лет, то нашли не менее 10 статей, описывающих тяжёлые осложнения в BMT-клинике, связанные с токсичностью ДМСО = 10%