Друзья,
помогите пожалуйста подобрать условия электропорации
прежде всего интресует мнение людей кто работал на multiporator eppendorf (4308 000.015) и получил достойную картинку
что меня пугает в приборе - в нем нельзя задавать Фарады, а можно только Вольты, вермя импульса и кол-во импульсов
что меня пугает в эксперименте - клетки все живы

я электропорировал mES cells в PBS (0,8ml), плазмидой GFP - эффективность менее 1%
мои параметры:
1) 250V 400mks 1 pulse - что то светилось
2) 320V 300mks 1 pulse - ничто не светилось
(1,5x10 7 клеток, 20mkg плазмиды в воде)

Может быть у кого нибудь есть отработанная методика на других клетках, это было бы для меня хорошим положительным контролем

К этому апарату табличка прилагается, на которой написаны параметры трансфекции разных типов клеток, по ней можно соорентироваться.

мне будет очень стыдно, если я ошибаюсь, но я такой таблички не видел

Попробуйте поискать ее в документации, котороя прилагалась к аппарату. Или попробуйте найти ее на сайте. Поверьте, она существует и будет вам хорошей помощью, если вы ее найдете.

нашел, но легче не стало ...((((