Полная версия страницы  English  

Методы

Pages: 1, 2, 3, 4, 5, 6
Faiz, 06.09.2006 15:02
Дорогие коллеги! Нужна консультация по наладке метода определения степени метилированности (суммарной) ДНК человека. Заранее благодарен.
Faiz, 06.09.2006 15:04
Дорогие коллеги! Нужна консультация по наладке метода определения степени метилированности суммарной ДНК человека. Заранее благодарен. mol.gif
Olori, 07.09.2006 21:25
Подскажите, пожалуйста, где посмотреть методику регенерации сефадекса. Заранее спасибо!
Гость, 20.09.2006 12:32
Господа, подскажите пожалуйста. В какие условия и как надо поместить мутант белка с 2-мя заменами на Cys, которые торетически находятся на достаточно близком расстоянии для образования S-S связи, что бы они эту самую связь образовали. Было бы супер если у кого-нибудь есть протокол подобных исследований. Заранее благодарен.
polosatiy, 20.09.2006 12:38
Господа, подскажите пожалуйста. В какие условия и как надо поместить мутант белка с 2-мя заменами на Cys, которые торетически находятся на достаточно близком расстоянии для образования S-S связи, что бы они эту самую связь образовали. Было бы супер если у кого-нибудь есть протокол подобных исследований. Заранее благодарен.
Гость, 04.10.2006 10:50
Что такое "vicroarray analis"
Гость, 04.10.2006 11:09
Простите, конечно, должно быть, что такое Microarray analisis?
Гость, 10.10.2006 11:08
Где можно найти протоколы по выращиванию макрофагов? Начала работать с линией J 774 A.1. Возможно ли клетки обрабатывать не только трипсином, но и неэнзиматическим раствором для диссоциации клеток?
Поделитесь, пожалуйста, своим опытом.
bagant, 12.10.2006 12:24
Уважаемые коллеги, будьте добры, поделитесь методами лиофильной сушки праймеров.
maclaud, 16.10.2006 13:22
коллеги, почему ничего не пишете о IS-PCR. нужны тонкости, помогите пожалуйста!спасибо
Gleb N, 20.10.2006 09:29
Уважаемые коллеги!!!!!!!!! Прошу помочь с методикой приготовления препаратов митотических хромосом Drosopila (из нервных ганглиев личинок)!Нигде не могу найти! Спасибо!
Гость, 23.10.2006 21:35
Други! Помогите с материалом по пожневной или поукосной гречихе. Спасибо. Фарыч!
Гость, 30.10.2006 11:29
Коллеги! Если кто-нибудь из вас делал иммунногистохимическое окрашивание на c-fos, поделитесь, пожалуйста, опытом. В частности, меня интересует, в каких соотношениях смешиваются компоненты из ABC kit. Заранее благодарю.
chepe, 31.10.2006 11:42
Подскажите, пож., методику окрашивания сиалил производных для количественного определения их в растворе. Спасибо!!!
Гость, 16.11.2006 12:37
HELP!
Для сиквенса 16s ставила ПЦР с праймерами f27-r1392 и f530-r1525. Получала толстый фрагмент, но под ним шла паразитная полоска с низкой концентрацией в каждом случае. Элюировала толстую полосу из геля и ставила ре-ПЦР с теми же праймерами и еще с внутренними: с матрицы f27-r1392 ставила с праймерами 40-1392, 357-1392, с матрицы f530-r1525 с праймерами 530-1492. Во всех случаях та же самая история - идет дополнительная полоса. Вряд ли это внутреннее праймирование, но я боюсь, что при сиквенсе будет ерунда. Насколько плачевна моя ситуация? Может, я гоню волну?
Заранее благодарна.
Гость, 17.11.2006 16:45
Народ!!!!! Помогите, пожалуйста!!!!!! Кто-нибудь работал с мРНК вирусных белков ВПГ и ЦМВ??? Поскажите, пожалуйста методику определения. И где можно достать необходимые реактивы!!!!!!!
EfimovRoman, 12.12.2006 11:17
Уважаемые коллеги!
Подскажите пожалуйста, где можно обучиться методам аллозимного и микросателлитного анализа. В случае обучения рассматриваются различные варианты сотрудничества или другие варианты.
Заранее благодарен
Гость, 26.12.2006 15:35
Уважаемые коллеги! Помогите, пожалуйста!!! Пытаемся оценить количество лимфоцитов периферической крови, экспрессирующих Chk2 на проточном цитофлуориметре.Используем первичные антитела к Chk2 и вторичные антитела, меченные FITC (фирмы Becton Dickinson), клетки красим PI. Под микроскопом клетки светятся, киназа тоже. При цитометрии четко заметная популяция FITC-положительных клеток (Chk2)регистрируется только на одной из гистограмм (Count(осьY), FITC (ось Х))- около 17%. Подскажите,пожалуйста, как грамотно составить протоколы измерения и настроить параметры SS, FS,FL1, FL3.
:), 02.01.2007 17:52
(Гость @ 04.10.2006 10:09)
Ссылка на исходное сообщение  Простите, конечно, должно быть, что такое Мицроарраы аналисис?

А почему бы не Microarray Analysis ? confused.gif confused.gif confused.gif
http://www.nslij-genetics.org/microarray/
Гость, 17.01.2007 03:37
vot site, neplohoy, s raznymi basic methods in various fields of Mol/Cell Biol, i, kazhetsya, nadurnyak:
http://www.molecularstation.com/protocol-links/
Гость, 17.01.2007 04:05
i vot yeshe odin classnyi site:
www.google.com
chego napishesh, na vse otvet dast....
Гость, 29.01.2007 20:16
подскажите пожалуйста нингидриновую методику количественного определения альфа-аминного азота.
tohir-v, 01.02.2007 18:03
полдскажите пожалуйста метод выделения микро РНК из растений.
Гость, 06.02.2007 13:36
Гость /16.11.2006 11:37/
HELP!
Для сиквенса 16s ставила ПЦР с праймерами f27-r1392 и f530-r1525. Получала толстый фрагмент, но под ним шла паразитная полоска с низкой концентрацией в каждом случае. Элюировала толстую полосу из геля и ставила ре-ПЦР с теми же праймерами и еще с внутренними: с матрицы f27-r1392 ставила с праймерами 40-1392, 357-1392, с матрицы f530-r1525 с праймерами 530-1492. Во всех случаях та же самая история - идет дополнительная полоса. Вряд ли это внутреннее праймирование, но я боюсь, что при сиквенсе будет ерунда. Насколько плачевна моя ситуация? Может, я гоню волну?
Заранее благодарна.
___________________________________
Попробуйте оптимизировать концентрации праймеров в реакционной смеси.
Гость, 06.02.2007 17:26
Уважаемые коллеги, помогите советом. При определении ПОЛ в мембранах эритроцитов обязательно проводить гемолиз или можно обойтись без него и работать с изотоническим раствором целых эритроцитов. Дело в том, что в одних методиках требуется брать осадок эритроцитов после гемолиза, в других - гемолизат, а в третьих вообще не надо проводить гемолиз. Заранее благодарны.
Гость, 12.02.2007 17:11
Коллеги, нужно подробное описание метода детекции мутаций у дрозофил Мёллер-5 на английском языке. Посодействуйте плиз. Аспирантик у нас из Индии. По русски не сечет, а задача ему, болезному поставлена. Жаль, бедолагу ))
fresl, 19.02.2007 08:54
Подскажите пожалуйста каким способом лучше всего хранить человеческую днк?
PRRSS, 19.02.2007 11:06
Люди,добрые, поможите.
При использовании комерческого набора твердофазного ИФА для определения Ат с адсорбированным в лунках рекомбинантным белком (Е.coli)возможно ли частичное ингибирование реакции при наличии в сыворотке специфических Ат???
guest: ммм , 19.02.2007 12:22
---возможно ли частичное ингибирование реакции при наличии в сыворотке специфических Ат.

Возможно, только наличие или присутствие антител здесь не так важно, просто когда они присутствуют вы можете это ингибирование заметить, если у вас есть независимый метод определения антител. А причина наличие в сыворотке веществ препятствующих связыванию антител с антигеном.

--При использовании комерческого набора твердофазного ИФА для определения Ат с адсорбированным в лунках рекомбинантным белком.

Кстати ИФА конкурентный прямой(не прямой) или простой на связывание (ессно не прямой)
Гость, 20.02.2007 14:21
коллеги, пришлите метод спектрофотометрический определения каталазной активности и условия определения
Гость, 07.03.2007 11:39
А что такое NT (применительно к температуре)? Впервые встречаю такое обозначение!
Гость, 16.03.2007 10:38
Народ помогите кто может, подскажите как определить белок если pH больше 11, а в среде полиэлектролиты (Полистиролсульфонат и полиаллиламин) ????
guest: ммм , 18.03.2007 12:37
---Народ помогите кто может, подскажите как определить белок если pH больше 11, а в среде полиэлектролиты (Полистиролсульфонат и полиаллиламин) ????

Как, как? Во первых может помочь Лоури.
Во вторых избавится надо от этого гафтна, к тому же совершенно непонятно, как это у вас полиамин на полисульфонат не залипает в растворе
Elena-, 18.03.2007 21:06
(lkorochkin @ 06.09.2006 01:42)
Ссылка на исходное сообщение  Народ, у кого есть методика по получению культур клеток Drosophila melanogaster поделитесь!


У меня есть методика получения культур клеток фибробластов зародыша ципленка. Если попробовать с ее помощю получить культуру клеток из личинок или куколок?
Гость, 19.03.2007 18:37
Сорчно! -(заказываем реактивы быстро-быстро!) нужны флюорометрические методикм определения серо тонина, норадреналина и дофамина. Погдскажите хотя бы ссылки литературные или в нете, где посмотреть.
Cathie22, 20.03.2007 10:02
(Гость @ 07.03.2007 11:39)
Ссылка на исходное сообщение  А что такое NT (применительно к температуре)? Впервые встречаю такое обозначение!

Вроде это комнатная температура=normal temperature. Хотя скорее должно быть RT=room temperature rolleyes.gif
Гость, 20.03.2007 14:25
Большое спасибо, но к сожелению от "гафтна" я избавиться не могуа,а вот полиамин на полисульфонат "залипает" но так и задумано, есть еще метода??? и не страшен ли для Лоури pH 12???
guest: ммм , 20.03.2007 18:12
--определить белок если pH больше 11
---не страшен ли для Лоури pH 12
Следующий вопрос будет про рН 13, Да!?
Вы пропись Лоури читали? Там первый раствор это двухвалентная медь в 0.1М NaOH
рН подозреваю между 12 и 13.

---но к сожелению от "гафтна" я избавиться не могуа,
Какой-то вы "Брюс не всемогущий".
--а вот полиамин на полисульфонат "залипает", но так и задумано.

Дык изче и извращенец, что за ужосные цели у таких экспериментов.

Это же надо, вы наверное наблюдаете копулятивные процессы между полиэлектролитами. no.gif wink.gif

А вообще все это мне напоминает добавление коагулянтов к органическим отходам.
Гость, 21.03.2007 11:37
Почти, Почти, Почти угадал, мы занимаемся инкапсулированием белков в полиэлектролитные микрокапсулы (метод поочередной адсорбции), но такие недюженные знания в коагуляции органических отходов весьма похвальны!!!! Не менее интересны и предложения о копулятивных процессов между полиэлектролитами!!! А вот Лоури в конечном растворе не дает и pH 11.
P.S. Спасибо, я так понял (между рассказами о моих извращенчиских наклонностях) pH 12 для Лоури копейки.
guest: ммм , 21.03.2007 14:40
-- А вот Лоури в конечном растворе не дает и pH 11.

Дык! то в конечном. А в начальном сильная щелочь и она там штатно так что ессли в вашем исходном растворе будет рН 12 то это "копейки"

Вод "гумос" это ваш с Фолиным может осадки нехилые давать так, что рекомендую SDS побольше напихать в пробу, на всякий случай.
Гость, 22.03.2007 00:50
15_01 - это протокол уже неделю не открывается, а мне надо РНКу из вируса выделить:( М.б. кто-нить знает как это лучше всего зделать?
Гость, 25.03.2007 15:25
Нароод. Подскажите где найти методы по работе со стволовыми клетками. В частности регенерации тканей.
Гость, 26.03.2007 06:33
Люди добрые, подскажите, пожалуйста, где найти концентрацию кислорода в нМолях в водных растворах при различных температурах.
Гость, 28.03.2007 18:25
Люди добрые, помогите советом:

пытаюсь получить полную ORF of cDNA (из ЕСТ библиотеки), which is bloody LONG (~5-10 kb)... естесно, есть 3-конец, но 5 не дается: RACE не работает (игрался с температурами ПЦР, нестед праймеры, концентрацией Mg)

Если знаете, можно ли как-нибудь RACE работать заставить, или гиблое дело? Если так, то чего делать? Я думаю, скрининг ЕСТ библиотеки имеющимся фрагментом, в надежде чего поближе к 5-концу получить. Еще идеи?

Спасибо заранее,
Антон
guest: Anton , 28.03.2007 18:29
Люди добрые, помогите советом:

пытаюсь получить полную ORF of cDNA (из ЕСТ библиотеки), which is bloody LONG (~5-10 kb)... естесно, есть 3-конец, но 5 не дается: RACE не работает (игрался с температурами ПЦР, нестед праймеры, концентрацией Mg)

Если знаете, можно ли как-нибудь RACE работать заставить, или гиблое дело? Если так, то чего делать? Я думаю, скрининг ЕСТ библиотеки имеющимся фрагментом, в надежде чего поближе к 5-концу получить. Еще идеи?

Спасибо заранее,
Антон
dpl, 30.03.2007 20:10
помогите пожалуйста!!
Если у кого-то есть методика окрашивания стволовых клеток на щелочную фосфотазу, напишите пожалуйста.
guest: Гость , 12.04.2007 20:32
Люди добрые, помогите, пожалуйста:
кто-нибудь выделял 2-ОГДК в больших количествах? Методику подсказать можете?
Спасибо заранее,
Надя
Гость, 12.04.2007 22:52
Коллеги! Посоветуйте.... никак не могу выделить ДНК из стрекоз из коллекции засушенных, 100-летней и более двности. увеличивал продолжительность лизиса, ничего не выходит..
Гость, 16.04.2007 00:11
Подскажите, пожалуйста, метод ПЦР на колониях дрожжей. Пробовала кипятить в 0,25%SDS+0.05M NaOH и добавлять прямо в смесь ПЦР. Результаты неоднозначные, интенсивность сигнала меняется при повторах. Прямо не знаю, что делать. Спасибо.

С ув. Елена.
Jakov, 23.04.2007 07:35
уважаемые коллеги! подскажите пожалуйста методику обработки РНК ДНКазой!
пример протокола. спасибо.
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.