Помогите, пожалуйста, разобраться, как работать с сайтами рестрикции, которые подвергаются указанному в заголовке метилированию, которое, в свою очередь, рестрикцию блокирует. Что нежелательно.
На сколько я поняла для предотвращения Dam-метилирования используют специальные штаммы, например SCS110. Какие ещё есть для этого штаммы? И какие позволяют избегать CpG-метилирования одновременно с Dam-.
И имеет ли смысл вообще связываться?
Ситуация такая, что мне нужно либо вводить в вектор (pcDNA4/HismaxC) сайт рестрикции (ClaI или Eco47III), узнаваемый энтими самыми метилазами, и дальше по нему вставлять свой ген или, возможно, серию(!) генов. Либо каждый из этой серии генов клонировать в две стадии по имеющимся сайтам. Что на ваш взгляд более разумно?
Спасибо!