Вопрос такой.
Если есть задача определить относительное количество мезенхимальных/гемопоэтических стволовых клеток в общей популяции трансплантируемых клеток у мышей.
для этого предлагают (среди прочего) определять количиество позитивных по CD34, CD73, CD90 и CD105 клеток. Я посмотрел по статьяим (если честно довольно бегло), большинство определяет их в отдельных пробирках, используя FITC и(или) PE. Можно ли попробовать определить их в одной/двух пробирках и какие комбинации флюорохромов лучше использовать?
прибор - FACSCalibur.

Раз Калибур - то да, придется 4 образца делать (ибо у него всего 4 цвета- и они будут заняты)- максимум по две "стволовушных" метки (если без дампа) на семпл.

Для нормального фенотайпинга в вашем случае ищите, хотя бы, Canto II с 8 цветами.

P.S. А статьи, судя по всему, либо старые, либо написаны, опять таки, "сканшиками", "эксельщиками" и "калибурщиками".

А что же касается оптимальной комбинации флуорохромов, то для FACSCalibur , для 4-х цветки это: FITC-PE-PerCP-APC

Далее - каталоги BD, eBioscience, BioLegend и Biocompare.com- в помошь (для конкретного подбора коньюгатов).

Простите, без чего?

p.s. Canto II в принципе доступен, но сам я работаю на Calibur, поэтому и метки подбираю в соответствии со своим девайсом.
p.p.s. Обязательно ли нужно добавлять реактив для определения жизнеспособности?

1. Dump channel - для отсечки ненужных сабсетов
2. Да.

Если Canto II доступен- то надо юзать.