Полная версия страницы  English  

Электропорация клеток крови человека

J.Khant, 06.12.2011 04:54
Всем доброго времени суток!
Решили купить электропоратор (ЭП) для трансфекции ДНК в клетки крови человека, конкретно в мононуклеары. Выбор встал между BioRad GenePulser и BTX 830 ECM. В BioRad смущает то, что большинство протоколов заточено под клеточные линии, а в статьях очень мало найдено примеров для применения данного ЭП в преклинических или клинических испытаниях. поэтому первый вопрос - кто нибудь проводит электропорацию клеток крови с помощью системы BioRad. какая получается эффективность и жизнеспособность клеток?
С другой стороны, найдены статьи с использованием BTX, и вроде как он даже создавался специально под работу с клетками крови человека. Смущает только то, что фирма неизвестная и непонятно, как будет с поставкой, ну и надежность прибора сама по себе. Собственно вопрос в этом и заключается: кто нибудь сталкивался с данным прибором BTX? поделитесь впечатлениями (эффективность трансфекции и жизнеспособность клеток).
Если кто то использует другие приборы с данной целью, то какие и почему был сделан выбор именного вашего прибора.
Andrew, 06.12.2011 19:54
У меня был неплохой результат на мононуклеарах на Amaxa Nucleofector в сочетанием со спец. китом для лимфоцитов (Lonza). Если планируете работать с мононуклеарами нужно брать его. У меня стоит старый GenePulser, используется для бактерий и дрожжей. Пару раз пробовал и мононуклеары, но эффективность была очень низкой (хотя тут конечно важен протокол и среда, а я оптимизацией не занимался).
J.Khant, 07.12.2011 06:19
Проблема заключаемся в том, что наша работа нацелена на клинику, и использование дополнительных реагентов для трансфекции не желательно. Вы не сравнивали эфективность трансфекции с использованием кита и без него?
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2012 Invision Power Services, Inc.