Кто нибудь может мне помоч достать пропись выделения и культивирования стволовых клеток?

Какие именно стволовые клетки вам нужны? И потом, лучше всего здесь вы сами сможете себе помочь. Заходите в PabMed, задаете ключевые слова и смотрите в статьях протоколы. Статей по любым стволовым клеткам сейчас море.

Диана, попробуй обратиться в ЦИН, вроде бы они стволовыми клетками занимаются. Наверняка у них есть все, что тебе нужно

Точно-точно, в ЦИНе!

мышиные ES -
http://www.esgro-lif.com/esgro/protocols.htm
http://www.ebioinfogen.com/cell_culture.htm
http://www.molgen.mpg.de/~soldatov/protoco...ol/02/02_02.htm
http://saturn.med.nyu.edu/research/mp/ronl...ll_culture.html
http://medicine.wustl.edu/~escore/htmldocs...cs/protocol.htm

В ЦИНе есть уже готовые линии, а насчет выделения новых - с этим похуже. Мышиные точно не выделяют, человеческие - выделяли некоторое время назад, но чем эта авантюра закончилась, достоверно неизвестно

Линии hES в России есть в НИИ Цитологии в Питере у Никольского и в НИИ Биологии Гена (москва) у Киселёва, обратитесь к ним, думаю они поделятся, особенно москвичи

Cells-nnm вы вопрос внимательно читали? Человеку не клетки нужны, а протоколы и речь не обязательно про мышиные эмбриональные.

Ну так он и дал ссылки на протоколы. hES - это human ES, а не мышиные.

Ссылки на протоколы он дал по эмбриональным мышиным. Человек же спрашивал о стволовых клетках, а это не обзательно эмбриональные. Это могут быть нск, мск и т.д. Кстати, сам автор столь неопределенного запроса больше не появился.

Кто-нибудь может помочь с ссылками на протоколы выделения стволовых клеток из пуповинной крови?

CD34+?
Зайдите сюда:
http://www.miltenyibiotech.com/nn.256,7af3...f2a6,index.html

to Lexx84 -
если вы про HSC, то я их выделяю из cord blood
в общем виде протокол выглядит сделующим образом:

1. выделение мононуклеаров из цельной крови
2. энричмент (обогащение)
3. сортинг (любой)
-----------
если нужны детали - спрашивайте


есть киты:
рекомендую SCT - RosetteSep Cord Blood Progenitor Cell Enrichment Cocktail
cat # 15026 = $271.00 (USD)
cat # 15066 = $1,137.00 (USD)

подробности на сайте www.stemcell.com

Нужны детали... Только начинаю окунаться в область HSC, поэтому хотелось бы найти литературу для начинающих, быстро обучающихся чайников, так как многое непонятно

А whole-blood киты - не нравятся?

А у кого-нибудь есть опыт работы с их китами для выделения на колонках?

для этого вам сначала нужно прочитать книжки и обзорные статьи, и определиться по нижеприведённым пунктам - что вам надо?
после этого последуют детали
1. human or mouse or???
2. источник HSC (насколько я понял автора интересует human cord blood?)
3. популяция HSC - она как известно гетерогенна, опции -
- CD34+ total or subsets
- CD133+ total or CD133+/CD34+
- SP+ (side population)
- Lin(-) total or subsets (например Lin-/CD34+; Lin-/CD34-; Lin-/CD34+/CD38- и т.д.)
- ADH+ (aldehyde dehydrogenase)
- у мышей - Lin-/sca-1+/c-kit+
и т.д.
4. определится с методами энричмента, исходя от возможностей (реактивов и методик) лабы или покупать киты
5. определиться с сортингом - в зависимости что у вас стоит в facility - есть ли флюоресцентный сортер и какой (сколько цветов), есть ли autoMACS или miniMACS?
6. Отталкиваться от целей, задач и количества выделенный денег напроект

можно спросисить ещё и на специализированных форумах -
http://celltranspl.ru/forum/viewforum.php?f=18
http://celltranspl.ru/forum/viewforum.php?f=22


to факсер -
так вроде тот кит что я написал это для whole blood, но могу ошибаться, надо почитать
а у вас есть примеры китов для энричмента HSC из whole blood?

вообще я сам с китами не работал - лаба не может себе позволить столь дорогое удовольствие

В ЛА работали с CD34+ whole blood positive selection kit.
Потом я у камрадов негативную фракцию забирал ( ибо мне iNKT из пуповинки нужны были).

не авантюра это
линии получены, но контаминированы фибробластами
сейчас идет новая серия экспериментов по получению новых и чистых

"В ЦИНе есть уже готовые линии, а насчет выделения новых - с этим похуже. Мышиные точно не выделяют, человеческие - выделяли некоторое время назад, но чем эта авантюра закончилась, достоверно неизвестно"


"не авантюра это
линии получены, но контаминированы фибробластами
сейчас идет новая серия экспериментов по получению новых и чистых"


.. И не все растут хорошо, так по крайней мере мне там сказали.

Обращаться надо к Пинаеву, если хотите линию, и к Полянской в случае метода. У них в конце октября будет специальная конференция по культивированию, думаю СК будет уделено немалое внимание.


РУССОМАХА

П.С. Но я так и не понял, какие "стволовые клетки" хочет "выделять и культивировать" инициатор топика...<a very vague question> выражаясь по-аглицки ;-)