Полная версия страницы  English  

Neskol'ko voprosov k specialistam po Facs

Fedo, 21.12.2005 16:33
Uvazhaemie kollegi, kto etim zanimaetsja.

Ne podskazhite prosten'kuju metodiku, kak pokrasit' kletki dlja FACSa...

Vopros dalle bolee mjagkij, objazatel'no li fiksirovat' kletki, i esli da to chem? 2% PFA ili 70% EtOH... I esli oni fiksirovany chem preamibilizirovat'? 0.25% Triton 100 v PBS? I kakuju konzentraziju antitel luchsche brat'? Kak dlja Westerna ili druguju?

Zaranee ogromnoe spasibo...

P.S. Esli vy deystvitel'no FACS specialist? Mozhet prosvjatite escho kak ja opredeljaju Apoptos na FACSe? Ja kraschu PI - delaju FACS i dalee? Kak ja raschityvaju % Apoptoticheskih kletok? Ili vse chto mertvye (svetjat'sja) - vse v apoptose? Vrode escho kak to mozhno bylo opredelit' kolichestvo kletok v raznyh fazah razvitija... No da lana - escho sam chego pochitaju...
Дядя ФАКСер, 21.12.2005 17:04
Ну, начнем.
Начнем со встречного вопроса: какая у вас задача? Какие клетки? Что хотите "увидеть"?
Получив ответ- с этого и начнем плясать.

Вообще же- читfйте Current protocols in Flow Cytometry, пролистайты выложенные на данном форуме в разделе "Литература" книги (там линк на Шапиро есть- сейчас в свободном он-лайн доступе).

P.S. Режим фиксации -пермеабилизации - разный, для разных клеток. smile.gif
Для лимфоцитов лучше всего - фиксация 2%PF, пермеабилизация - сапонином.
А вообще- используйте BD Cytofix-cytoperm kit.

P.P.S. Для детекции апоптоза одного PI недостаточно- ибо он окрасит и late apotic и dead - нужно Annexin-V + PI- что б постадийно посмотреть+ морфологический гейтинг.

P.P.P.S.....
Fedo, 21.12.2005 17:46
Клетки - Mouse Embrionic Fibroblasts

Увидеть надо слабblй сигнал GFP...
Fedo, 21.12.2005 18:01
K sozhaleniju u menja net dostupa k etoy knige frown.gif( Ja imeju vvidu Current protocols in Flow Cytometry...

Hotja bylo by interesno pochitat' neskol'ko razdelov ottuda... Porobuju iz Doma potom posmotret' cherez Google Book ;-))
nigoal123, 07.06.2022 12:31
I am not ashamed to nigoal admit that when I was ลิงค์รับทรัพย์ first learning how to sexy gaming build a blog I made dream gaming a ton of mistakes. ka gaming You can benefit from
I created this free guide nigoal 50รับ100 more than a decade of พริตตี้เกมมิ่ง my experience so that PG SLOT you don’t repeat these same พนันออนไลน์ mistakes when you สูตรสล็อต make your own blog.
Ufa1688, 19.09.2022 19:04
But there were darker สล็อตออนไลน์ sides to British rule in Singapore UFA1688 too. Experts point out the colonial ลิงค์รับทรัพย์ administration suppressed แฮนดิแคป the local identity and aff 1688 made English the official language. ufabet เข้า สู่ระบบ They also say modern Singapore’s ทางเข้าufa1688 infamous tough stance บอลสเต็บ towards hard drugs was ราคาบอล a result of colonial Britain’s lucrative ufa1688 opium trade.
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.