Добавляю клеткам всякого рода гадости, от которых они должны в дозо - зависимой манере гибнуть... считаю их по МТТ и всё время оказывается, что в больших концентрациях вещества, как и ожидается - гибнет много, а вот в малых почему то клеток больше относительно контроля....в чем причина? Почему малые концентрации практически любых моих белков вызывают небольшой всплеск пролиферации (если можно так сказать).?

А насколько сей эффект достоверен и значим?

Вы конечно очень мало написали о том как вы ставите ваш MTT анализ, но могу допустить, что необработанный контроль оказывается в краевых лунках 96луночного планшета. И то что вы видете это краевой эффект. Попробуйте не добавлять ничего и посмотреть насколько зависят полученные значения оптической плотности от положения лунки в планшете.

краевые лунки в планшете я не трогаю, они залиты обычной средой с антибиотиками... то бишь значений у меня всего по шесть лунок в ряду, а рядов - 10, контроль делаю в середине в 7ом ряду, как то поставила два контроля в 9 (типа краевом) ряду и в середине, контроль одинаковый получился а вот там где белок в мизерной конц. - опять таки больше контроля странно...достоверность... блин я еще не досчитала, ну грубо говоря опт. плотность среднего значения к - 1,3; с белком низкой конц. -1,56; с белком высокой конц. -0,77

Я не удивлюсь, если у Вас мизерные концентрации действительно стимулируют рост культуры. Частая история - то, что в высоких концентрациях токсично/мутагенно/канцергненно/и прочие гадости - в низких проявляет протекторные свойства. Литературы на эту тему много.
У нас, кстати, такой же эффект неожиданно выскочил для митомицина С: 0,1 мкг/мл стимулировал пролиферацию.

У Вас белок в качестве цитотоксического агента? Очень приятно, я тоже похожими делами занимаюсь. Если не секрет - Вы где работаете?

Кстати, про МТТ. Вероятно, Вы это знаете и без меня, но на всякий случай напомню: оптическая плотность для этого метода окраски - это функция двух переменных: не только густоты клеточного слоя, но и интенсивности клеточного метаболизма.

Прошу прощения, предыдущий постинг, подписанный xsana, на самом деле мой.

Аналогично предыдущему автору - часто ингибиторы в низких концентрациях действуют стимулирующе.

А еще перед тем как лизировать кристаллы формазана поглядите на них глазиками в микроскоп. Сравните их форму и размер в контролях и опыте. Бывает очень полезно, особенно когда такие результаты получаются. Очень яркая картинка метаболизма видна.

"всё о чем вы хотели знать, но боялись спросить" )Спасибо за ответы..я так и думала
ту L^2M ага белок, разные белки, токсины итд... в ибх работаю а вы где? если тоже не секрет?
Про МТТ это вы очень интересно начали... действительно, форма кристаллов различна,явно это вижу, но обьяснить почему - не могу... во первых окраска - некотторые клетки синие, некоторые с фиолетовым оттенком, во вторых: одни игольчатее другие практически нет ... буду немеренно благодарна, если прольете свет на сию проблему... спасибо

2Настасья Филипповна:
Тоже не секрет: в Киеве, в И-те мол. биологии и генетики. Клетки травлю кроме всего прочего - белками (фитолектины главным образом).
Кстати, хотите элиминировать фактор интенсивности метаболизма - покрасьте бромфеноловым синим или сульфородамином. Но тогда уже некорректным будет сравнивать результаты с предыдущими, полученными с применением МТТ. Впрочем, можно при желании каждую плашку в двух вариантах ставить - для окраски МТТ и для как выше.

С кристаллами примитивно просто - чем они (их) больше, тем интенсивнее метаболизм в данной конкретной клетке, и тем быстрее МТТ преобразуется в формазан.

Гомеопатия

[Текст переведён с транслита]

Хотя на самом деле уже очевидно, что консультации с широким активом способствует подготовке и реализации системы массового участия. https://www.weddingbee.com/members/gennadij32y1/

But there were darker สล็อตออนไลน์ sides to British rule in Singapore UFA1688 too. Experts point out the colonial ลิงค์รับทรัพย์ administration suppressed แฮนดิแคป the local identity and aff 1688 made English the official language. ufabet เข้า สู่ระบบ They also say modern Singapore’s ทางเข้าufa1688 infamous tough stance บอลสเต็บ towards hard drugs was ราคาบอล a result of colonial Britain’s lucrative ufa1688 opium trade.