Anonymous, 07.01.2002 16:34
Господа! Я совем новичек в блоттинге (western) и кроме всего прочего у меня нет аппратного обеспечения для его проведения. Как можно сделать его своими руками? Думаю проблема знакома многим так как руководство задачи ставит, а денег на реализацию не дает :-(
Спасибо за внимание
Аркадий Абаев.
Anonymous, 08.01.2002 14:05
А что вы конкретно хотите сделать, камеру для электрофореза или для переноса?
форезную камеру еще можно попробовать самому склеить, а для полусухого переноса - тяжеловато.
Anonymous, 08.01.2002 15:19
Это просто. Взять маленький аквариум, лучше из оргстекла. Вырезать из стали прямоугольные электроды (с отгибами) по форме стенок аквариума и просверлить в них много дырок, чтобы пузыри выходили. Еще нужны две пластины из оргстекла (тоже с дырками), чтобы между ними зажимать обычный "бутерброд" из фильтровалки, ватмана, геля и мембраны (все это закрепляется резинкой). Ну, и пара проводов с крокодилами, чтобы прицеплять к электродам. Перенос ставится в Трис-глициновом форезном буфере. К концу переноса раствор становится бурым от железа, но на Вестерн это никак не влияет, проверено.
Желаю удачи.
K^2
Anonymous, 08.01.2002 15:19
Это просто. Взять маленький аквариум, лучше из оргстекла. Вырезать из стали прямоугольные электроды (с отгибами) по форме стенок аквариума и просверлить в них много дырок, чтобы пузыри выходили. Еще нужны две пластины из оргстекла (тоже с дырками), чтобы между ними зажимать обычный "бутерброд" из фильтровалки, ватмана, геля и мембраны (все это закрепляется резинкой). Ну, и пара проводов с крокодилами, чтобы прицеплять к электродам. Перенос ставится в Трис-глициновом форезном буфере. К концу переноса раствор становится бурым от железа, но на Вестерн это никак не влияет, проверено.
Желаю удачи.
K^2
Anonymous, 08.01.2002 18:20
Oh, my God...
Anonymous, 08.01.2002 21:14
Не легче ли купить прибор для переноса? Дешевле обойдется, чем такой геморрой городить....
Anonymous, 09.01.2002 10:05
Ну, если очень хочется по..., то можно взять какую-нибудь литературу постарше, там обычно, пишут, как сделать прибор самому, конструкции нарисованы. Например ЛА Остерман "Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование", 1981.
Если нет денег на фирменные, то найдите людей, делающих это хорошо (обычно такие умельцы обитают возле НИИ и фирм, делающих диагностические наборы)- выйдет дешевле и лучше, чем вы сами будете изобретать велосипед.
И последний совет - электроды все-таки нужно делать из платины или специальных сплавов (кажется титанового).
Anonymous, 09.01.2002 13:35
Вот еще одна модификация "аквариума": электроды из проволоки (+, ес-сно, из платины) вертикально в двух противоположных углах, а бутерброд (или, если угодно, биг-мак) между дырявыми плексовыми пластинами вставляется по другой диагонали и держится самой камерой.
Такой прибор можно заказать в любой мастерской.
Вместо "аквариума" годится подходящего размера прямоугольная камера для хроматографии, но лучше сделать на заказ из плекса.
В общем, не так уж и сложно.
K^2.
Anonymous, 09.01.2002 13:38
В обоих случаях я описывал камеры для переноса (т.е. собственно блоттинга), а не для фореза.
K^2
moonlife447, 25.09.2022 11:49
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную,
щелкните здесь.