Полная версия страницы  English  

Кометный форез

guest: Lilia, 19.04.2006 14:23
Уважаемые коллеги! Помогите найти протокол кометного фореза (все формы). Буду очень благодарна.[size=5]
Lilia, 19.04.2006 14:45
Уважаемые коллеги, помогите, пожалуста, найти протокол кометного фореза(всех форм) или ссылку на него.
semi, 19.04.2006 17:13
полезный сайт
http://cometassay.com/
Там и протоколы имеются, и вопросы задать сообществу можно.
Pharmaсol, 19.04.2006 22:17
Интересное словосочетание "кометный форез". Что Вы подразумеваете под ним? Отдельно этап электрофореза микропрепаратов? Или весь метод целиком? Semi дал хорошую ссылку - там есть все. А методика от А до Я - это статья Tice R. и соавт., кажется 98 года. Пабмед поможет!
Pharmaсol, 19.04.2006 22:19
Сорри, ....Semi дала хорошую ссылку......
lutiy, 23.10.2007 12:39
Обожаемые коллеги, такое дело:
какой вольтаж лучше ставить при форезе к примеру мышинных стволовых клеток?
если просто делать как указано в протоколе http://cometassay.com/materials_and_protocols.htm получается лажа.
Заранее спасибо.
L-2M, 23.10.2007 15:26
В смысле - лажа? Что именно Вы видите на форезе? Вы это видите только при работе с мышиными стволовыми - или еще с какими-то типами клеток?

В принципе, поиграться с вольтажом, концентрацией электрофоретического буфера и временем фореза можно; но предварительно неплохо бы попробовать предположить и другие возможные причины лажи.
Например, Вы уверены, что дело именно в режиме фореза? Может, Вам стоит уменьшить/увеличить время инкубации геля в литическом буфере? Мы в свое время набили пару шишек именно на этом; в результате для каждого нового типа клеток мы теперь подбираем время лизиса эмпирически, под контролем светового микроскопа. И, в порядке дутья на воду после ожога на молоке - делаем то же самое после приготовления новой партии литического буфера.
В методике есть еще несколько подводных камней (свет, температура, фаза роста клеточной культуры, etc), которые тоже могут привести к появлению на форезе лажи.
CellCulturist, 23.10.2007 16:11
фото выложите pls Основная проблема - с лизирующим раствором, вольтаж подбирается в зависимости от "хвостов". Вы в Москве?
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2012 Invision Power Services, Inc.