Подскажите пожалуйста как приготовить питательную среду 199! У меня в наличие имеется сухая среда 199 фирмы Himedia Laboratories. Готовлю среду согласно методике производителя, но полученная среда быстро закисляется, либо защелачивается! Перепробовал различные варианты, но не могу добиться стабильности pH. Может кто-то тоже сталкивался с данной проблемой подскажите, что делать! Заранее спасибо!

-У меня в наличие имеется сухая среда 199 фирмы Himedia Laboratories.
Я никогда не сталкивался с продукцией этой фирмы.
В каталоге вышеозначенной фирмы имеется 4(ЧЕТЫРЕ) вида этой среды, о какой из них вы спрашиваете?
Документация в pdf к сожалению не читается моим pdf просматривателем.

Я бы и рад помочь, но с таким количеством доступной информации просто НЕ МОГУ.

Вношу уточнения касательно питательной среды 199! У меня в наличии сухая среда 199 с солями для буфера Хенкса и L-глютамином без бикарбоната натрия фирмы Himedia Laboratories! Готовлю среду согласно методике!

ЕЩЕ РАЗ! МЕТОДИКУ!????? от ваших уточнений мне ни тепло не холодно. Ну и еще не плохо бы состав среды.

К сожалению состав среды на упаковке не указан, то что указано я писал в прошлом сообщение!
Приготовление среды производилось согласно методики производителя:
В мерную колбу на 1 л количественно перенести навеску сухой среды 12,5 г. Прилить 900 мл воды. Размешать до полного растворения среды. Внести гидрокарбонат натрия 0,35 г. Установить pH7,4-7,5, т.к при фильтрации среда несколько закисляется. Довести до метки. Перемешать.
Полученная среда стерилизовлась фильтрованием через фильтр Medisar 2000 (размер пор 0,2 мкр). рН готовой среды 7,1-7,3.
Но рН среды уже в течении дня начинает уменьшаться, как у среды стерилизованной, так и не стерилизованной!
Вода для приготовления среды получена из установки Basic TWF ultra plus
Проблема в том что стабильности среды никак не удается добиться!!!

Среда с какими газами имеет контакт после приготовления?
Вот это действие :
-"Установить pH7,4-7,5"
Вы как делаете?

И еще вопрос среда уже с глютамином?

Среда уже с глютамином!!!
рН после добавления гидрокарбоната в принципе становиться в рамки 7,4-7,5, но не всегда поэтому иногда приходиться доводить 1N раствором гидроксида натрия! Среда имеет разве что только контакт с воздухом!

Скорее всего закисляется СО2 воздуха. Для контроля поставьте среду в колбу и заткните ее пробкой с хлоркальциевой трубкой заполненой сухой щелочью, если после этого не закисляется, то виноват воздух. Но это ничего страшного не парьтесь, так и должно быть.

Ну я вот в четверг приготовил новую и рН меряю каждый час практически то пока держится на показателе 7,28 и не падает и не повышается!!!!

Есть такие pH-метры, где можно запись на комп выводить.

Ставите несколько баночек - закрытая, открытая, разная Т (температура) - и пишется все, дома чай пьете - потом сравниваете записи.

Но нам не нужны легкие пути!!!

--Ну я вот в четверг приготовил новую и рН меряю каждый час практически то пока держится на показателе 7,28 и не падает и не повышается!!!!

В лаборатолрии меньше людей. Или меньше горелок(спиртовок) работает , ну и тп.

Есть такие pH-метры, где можно запись на комп выводить.
Они то конечно есть, но у меня обычный стандартный рН-метр) поэтому приходиться сидеть и каждый час мерять)))

В лаборатолрии меньше людей. Или меньше горелок(спиртовок) работает , ну и тп.
В лаборатории нас всегда двое, но над средой работаю я один!!! Этот вариант исключен, но радасть моя в принципе была преждевременной, со вчерашнего дня рН стремительно пользет вниз и уже даже меньше нормы!!!
По поводу поддержания герметичности при хранени нет, и рН в бутылке при хранении не меняеться проблема состоит в том, что из лаборатории, тестировавшей среду, были замечания, что среда быстро закисляется при росте клеток, вот я и пытаюсь добится, что рН среды при использование так стремительно не закислялась!!! Как это того добиться пока не могу понять!
Уже и готовил среду на основе воды, прошедшей термическую обработку (автоклавирование) И ничего не помогает!!! Жду советов))))