Главная страница MolBiol.ru > Методы > Белки > Окрашивание гелей Imidazole/Zn Rambler's Top100
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Окрашивание белковых SDS PAAG с помощью Imidazole/Zn

Очень быстрый, удобный и чувствительный метод. Единственный недостаток метода - гель невозможно высушить, его приходится фотографировать на темном фоне, освещая сверху.

    Окрашивание

  1. сполоснуть в mQ 5'';
  2. уравновесить гель 0.2M Imidazole:
  3. % АА 10% 12.5% 15%
    время 5' 5-10' 15-30'
  4. окрасить покачивая ~1' в 0.3М ZnCl2
  5. сполоснуть в H2O;
  6. наблюдать на темном фоне, освещение сверху;
  7. хранить в H2O.


  8. Непроверенная информация Отмывка: (перед электроблотом)

  9. 2-3 раза (до прозрачности) по 10' в 2% лимонной кислоте;
  10. уравновесить30-60' в растворе для электропереноса:
  11. Tris Cl, pH8.3 50mM
    SDS <40kDa0.02%
    >40kDa0.1%
  12. фильтровальная бумага - тот же буфер без SDS;
  13. перенос: 2mA/cm2, 60' (или 3mA на индивидуальную полосу).


MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 9821

    Растворы

    Imidazole

    2M(хранить при 4oС):

    Конц.Сток50ml100ml
    Imidazole2M68.1g/M6.81g13.62g
    H2O mQ   

    ZnCl2

    3M (хранить при 4oС):

    Конц.Сток50ml100ml
    ZnCl23M136.28g/M20.44g40.88g
    H2O mQ   


    Комментарии

    Общие

  • Чувствительность: ~30x кумасси, <ceребро: ~3-30ng на бэнд.
  • Можно применять для окраски и соли Cu2+, но Zn2+ удобнее и чувствительнее.
  • Метод весьма чувствителен, поэтому:
    1. необходимо работать только в перчатках;
    2. качество воды очень критично, на всех этапах использовать только mQ.

    Дополнения, комментарии, вопросы





       


Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/


Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler